ANNEXE G
Glossaire des milieux
janvier 2006
GLOSSAIRE DES BOUILLONS, GÉLOSES ET AUTRES RÉACTIFS
SECTION H
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Heart Infusion (HI) Broth and Gélose (HIA) (for Vibrio*)
[Bouillon d'infusion de coeur et Gélose d'infusion de coeur (pour Vibrio*)] |
| Milieu de base |
| Infusion à partir de 500g de coeur de boeuf |
1,0 L |
| Tryptose |
10,0 g |
| Chlorure de sodium (NaCl) |
5,0 g |
| pH 7,4 ± 0,2 |
|
Milieu complet:
Bouillon: Ajouter les ingrédients du milieu de base à 1,0 L d'eau distillée et distribuer dans des éprouvettes. Stériliser à 121oC pendant 15 minutes.
*Pour les Vibrio spp. halophiles, ajouter un supplément de 15,0 g/L de NaCl.
Gélose: Ajouter les ingrédients du milieu de base et 15,0 g de gélose à 1,0 L d'eau distillée. Chauffer jusqu'à ébullition avec agitation constante pour dissoudre tous les ingrédients. Stériliser 121oC pendant 15 minutes.
| Hektoen Enteric Gélose [Gélose entérique Hektoen] |
| Milieu de base |
| Lactose |
12,0 g |
| Hydrolysât de tissus animaux |
12,0 g |
| Sucrose |
12,0 g |
| Sels biliaires |
9,0 g |
| Chlorure de sodium (NaCl) |
5,0 g |
| Thiosulfate de sodium (Na2S2O3) |
5,0 g |
| Extrait de levure |
3,0 g |
| Salicine |
2,0 g |
| Citrate d'ammonium et de fer |
1,5 g |
| Fuchsine acide |
0,1 g |
| Bleu de bromothymol |
0,064 g |
| Gélose |
13,5 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| pH 7,6 ± 0,2 |
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Milieu complet:
Ajouter les ingrédients du milieu de base à 1,0 L d'eau distillée. Chauffer jusqu'à ébullition avec agitation constante pour dissoudre tous les ingrédients. Ne pas stériliser à l'autoclave. Distribuer dans des boîtes de Pétri stériles.
| Mise en garde: Le fuchsine acide est un cancérigène potentiel et des précautions doivent être prises afin d'éviter l'inhalation du colorant en poudre et le contact avec la peau. Porter l'équipement de protection approprié. |
Hemolytic Ceftazidime-Lithium Chloride Agar (HCLA)*
[Gélose hémolytique au chlorure de lithium et à la ceftazidime ] * |
| Milieu de base |
| Base de gélose sang Columbia |
39,0 g |
| Chlorure de lithium (LiCl) |
7,5 g |
| Citrate d'ammonium et de fer |
0,5 g |
| Sulfonate de méthane de colistine (11 500 U.I./mg) |
10,0 mg |
| Gélose |
5,0 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| Sang de cheval |
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| pH 7,0 ± 0,2 |
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| Supplément d'antibiotique |
| Ceftazidime acide pentahydratée |
400 mg |
| Tampon phosphate 0,1 M (pH 7,0) |
100 mL |
Milieu complet:
| Note : Ce milieu est une modification du milieu MOX, avec une gélose de recouvrement non sélective de sang de cheval. |
Ajouter les ingrédients du milieu de base à 1,0 L d'eau distillée. Chauffer jusqu'à ébullition avec agitation constante pour dissoudre tous les ingrédients. Stériliser à 121oC pendant 15 minutes et refroidir à 45-50oC. Ajouter 5,0 mL de la solution d'antibiotique au milieu de base refroidi pour produire une concentration finale de 20,0 mg/L. Les géloses comportent une couche de base de 10,0 mL (sans le sang de cheval) sur laquelle est ajouté, peu après la solidification, 5,0 mL de la même gélose à laquelle on a ajouté du sang de cheval à 4 %, tempéré à 20oC.
Solution d'antibiotique: Dissoudre le ceftazidime dans le tampon phosphate et stériliser par filtration. Entreposer en portions de 5,0 mL à 4oC.
*Poysky, F.T., R.N. Paranjpye, L.C. Lashbrook., M.E. Peterson, G.A. Pelroy and M.W. Eklund. 1993. Selective and differential medium for isolation of Listeria monocytogenes from foods. J. Food Prot. 56:326-329, 332.
| HC (Hemorrhagic Coli) Agar [Gélose HC (coli hémorragique)] |
| Milieu de base |
| Tryptone |
20,0 g |
| Sels biliaires no. 3 |
1,12 g |
| Chlorure de sodium (NaCl) |
5,0 g |
| Sorbitol |
20,0 g |
| 4-méthylumbélliferyl-ß-D-glucoronide (MUG) |
0,1 g |
| Violet de bromocrésol |
0,015 g |
| Gélose |
15,0 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| pH 7,2 ± 0,2 |
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Milieu complet:
Ajouter les ingrédients du milieu de base à 1,0 L d'eau distillée. Chauffer jusqu'à ébullition avec agitation constante pour dissoudre tous les ingrédients. Stériliser à 121oC pendant 15 minutes.
| Note : Un milieu différent appelé Base de gélose HC est utilisé pour l'isolation des moisissures dans les produits cosmétiques. |
| Note : Le milieu peut être préparé avec ou sans l'addition de MUG. |
| Hippurate Hydrolysis Testing Reagents [Réactifs pour l'épreuve de l'hydrolyse de l'hippurate] |
| Solution d'hippurate de sodium |
| Hippurate de sodium |
1,25 g |
| Eau distillée |
50,0 mL |
| Solution de ninhydrine (préparée à chaque semaine) |
| Ninhydrine |
1,5 g |
| Acétone |
25,0 mL |
| Éthanol (95%) |
25,0 mL |
Milieu complet:
Solution d'hippurate de sodium: Dissoudre et stériliser par filtration sur membrane (pores de 0,2 µm). Distribuer en portions de 0,5 mL dans de petites éprouvettes. Fermer avec un bouchon de liège ou un bouchon vissant et entreposer à -20oC.
Solution de ninhydrine: Entreposer dans une bouteille brune à 4oC.
| Hugh-Leifson Glucose Broth (HLGB) [Bouillon de Hugh-Leifson glucosé] |
| Milieu de base |
| Peptone |
2,0 g |
| Extrait de levure |
0,5 g |
| Chlorure de sodium (NaCl) |
30,0 g |
| Glucose |
10,0 g |
| Violet de bromocrésol |
0,015 g |
| Gélose |
3,0 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| pH 7,4 ± 0,2 |
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Milieu complet:
Ajouter les ingrédients du milieu de base à 1,0 L d'eau distillée. Chauffer jusqu'à ébullition avec agitation constante pour dissoudre tous les ingrédients. Distribuer et stériliser à 121oC pendant 15 minutes.
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