Annexe G
Glossaire des milieux
janvier 2006
GLOSSAIRE DES BOUILLONS,GÉLOSES ET AUTRES RÉACTIFS
Section W
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| Wagatsuma agar (for Kanagawa test) [Gélose Wagatsuma] (pour l'épreuve Kanagawa) |
| Milieu de base |
| Peptone |
10,0 g |
| Chlorure de sodium (NaCl) |
70,0 g |
| Extrait de levure |
3,0 g |
| Phosphate dipotassique (K 2 HPO 4) |
5,0 g |
| Mannitol |
10,0 g |
| Gélose |
15,0 g |
| Violet de gentiane |
0,001 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| pH 8,.0 ± 0,2 |
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| Supplément |
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| Globules rouges frais (24h) humains ou de lapin avec anticoagulant |
50,0 mL |
| Solution saline physiologique |
200 - 250 mL |
Milieu complet:
Ajouter les ingrédients du milieu de base dans 1.0 L d'eau distillée. Faire bouillir pour dissoudre la gélose. Ajuster le pH à 8,0 ± 0,2. Placer dans un bain à vapeur pendant 30 minutes. NE PAS STÉRILISER À L'AUTOCLAVE. Laisser refroidir à 45-50oC.
Préparer le sang en mélangeant le sang frais (en dedans de 24 h du prélèvement) humain ou de lapin avec un volume équivalent ou supérieur de solution saline physiologique. Centrifuger à 4000 x g à 4oC pendant 15 minutes. Décanter la saline et laver deux fois de plus. Après le troisième lavage, décanter la saline et resuspendre les globules avec de la saline pour atteindre le volume original.
Ajouter 50 mL de globules rouges lavés au milieu de base. Mélanger et verser dans des boîtes de Pétri stériles. Faire sécher complètement et utiliser rapidement.
| Wilkins Chalgren Anaerobe Blood Agar [Gélose au sang anaérobie Wilkins Chalgren] |
| Milieu de base |
| Hydrolysât de caséine |
10,0 g |
| Peptone de gélatine |
10,0 g |
| Chlorure de sodium (NaCl) |
5,0 g |
| Extrait de levure |
5,0 g |
| Glucose |
1,0 g |
| L-arginine |
1,0 g |
| Pyruvate de sodium (C 3H 3O 3Na) |
1,0 g |
| Hémine |
5,0 mg |
| Ménadione (vitamine K) |
0,5 mg |
| Gélose |
10,0 g |
| Tween 80 |
1,0 mL |
| Eau distillée |
950 mL |
| pH 7,1 ± 0,2 |
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| Supplément |
|
| Sang de cheval lysé |
50,0 mL |
Milieu complet:
Ajouter les ingrédients du milieu de base à l'eau distillée et porter le volume à 950 mL. Mélanger soigneusement et chauffer doucement pour dissoudre la gélose. Stériliser à 121oC pendant 15 minutes et laisser refroidir à 50-55oC. Ajouter aseptiquement 50,0 mL de sang de cheval lysé. Mélanger soigneusement et répartir dans des boîtes de Pétri stériles.
| Wilkins Chalgren Anaerobe Broth [Bouillon anaérobie Wilkins Chalgren] |
| Milieu de base |
| Hydrolysât de caséine |
10,0 g |
| Peptone de gélatine |
10,0 g |
| Chlorure de sodium (NaCl) |
5,0 g |
| Extrait de levure |
5,0 g |
| Glucose |
1,0 g |
| L-arginine |
1,0 g |
| Pyruvate de sodium (C 3H 3O 3Na) |
1,0 g |
| Hémine |
5,0 mg |
| Ménadione (vitamine K) |
0,5 mg |
| Eau distillée |
1,0 L |
| pH 7,1 ± 0,2 |
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Milieu complet:
Dissoudre les ingrédients du milieu de base dans 1,0 L d'eau distillée. Mélanger soigneusement. Répartir dans des éprouvettes ou dans des flacons et stériliser à 121oC pendant 15 minutes.
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