Volumes 1-3
Septembre 1993

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1. Les aliments qui sont dilués à 1:100 ou plus n'ont généralement pas besoin d'être soumis à un traitement enzymatique. Lorsqu'on prépare des dilutions, il faut utiliser le diluant (0,1 %) eau peptonée (PEP) ou pepton Tween 80 (PET) suggéré dans les Tableaux 1 à 7.

2. SI L'ON UTILISE LES ENZYMES EZ^TM (GELMAN SCIENCES, MONTRÉAL, QUÉ.), PROCÉDER COMME SUIT:¹

3. Utiliser le traitement enzymatique recommandé dans les Tableaux 1 à 7.

4. Reconstituer une bouteille d'enzyme EZ^TM en y ajoutant 100 ml d'eau stérilisée et en remuant bien. Entreposer l'enzyme reconstituée non utilisée selon les instructions qui figurent sur l'étiquette.

5. Combiner dans une éprouvette stérilisée 5 ml d'un homogénat de l'échantillon et 1 ml de l'enzyme EZ^TM reconstituée afin d'obtenir la concentration finale voulue d'enzyme.

6. Incuber dans un bain-marie à 35 ^oC, pendant 20 à 30 minutes.

7. Passer le tube au vortex pour remettre l'échantillon en suspension et procéder aux analyses.

8. Filtrer 1,2 ml de l'homogénat traité aux enzymes, au lieu de 1 ml, afin de conserver un facteur de dilution de 10.

9. SI L'ON UTILISE LES ENZYMES SIGMA (SIGMA CHEMICAL CO., ST LOUIS, MISSOURI), PROCÉDER COMME SUIT:

10. Utiliser le traitement enzymatique recommandé au Tableau 8. Préparer des solutions-mères de l'enzyme tels que décrit à l'étape 14.

11. Combiner 5 ml d'une dilution 1:10 avec 1 ml de solution-mère d'enzyme.

12. Incuber dans un bain-marie à 35 ^oC, pendant 20 minutes.

13. Filtrer 1,2 ml d'homogénat traité aux enzymes afin de conserver un facteur de dilution de 10.

14. PRÉPARATION DES RÉACTIFS

¹Nous remercions la société QA Life Sciences Inc. (San Diego, Californie, États-Unis) de nous avoir permis d'utiliser des documents protégés par des droits d'auteur.