Annexe G
Glossaire des milieux
février 2006
GLOSSAIRE DES BOUILLONS,GÉLOSES ET AUTRES RÉACTIFS
Section P
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| Palcam Agar(PAL) [Gélose Palcam] |
| Milieu de base |
| Peptone |
23,0 g |
| Amidon |
1,0 g |
| Chlorure de sodium (NaCl) |
5,0 g |
| Levure |
3,0 g |
| Gélose |
13,0 g |
| Mannitol |
10,0 g |
| Citrate d'ammonium et de fer |
0,5 g |
| Esculine |
0,8 g |
| Dextrose |
0,5 g |
| Chlorure de lithium (LiCl) |
15,0 g |
| Rouge de phénol |
0,08 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| pH 7,2 ± 0,2 |
|
| Suppléments (pour 500 mL de milieu de base) |
| Polymyxine-B-sulfate |
5,0 mg |
| Ceftazidime |
10,0 mg |
| Acriflavine |
2,5 mg |
| Eau distillée |
5,0 mL |
Milieu complet:
Suspendre les ingrédients du milieu de base dans 1,0 L dl'eau distillée et ajuster le pH au besoin. Porter à ébullition jusqu'à dissolution complète. Stériliser à l'autoclave à 121oC pendant 15 minutes. Laisser refroidir à 50oC. Ajouter aseptiquement la solution de supplément à 500 mL de base de gélose refroidie (doubler la quantité pour 1,0 L). Mélanger soigneusement et répartir. Entreposer au réfrigérateur dans l'obscurité (l'acriflavine peut être photo-oxydé et former des composés inhibiteurs pour les Listeria spp.).
Solution de supplément : Ajouter les ingrédients du supplément à 5,0 mL d'eau distillée. Stériliser par filtration.
| Palcam Broth [Bouillon Palcam] |
| Milieu de base |
| Peptone |
23,0 g |
| Extrait de levure |
5,0 g |
| Chlorure de lithium (LiCl) |
10,0 g |
| Esculine |
0,8 g |
| Citrate d'ammonium et de fer (III) |
0,5 g |
| D(-) mannitol |
5,0 g |
| Rouge de phénol |
0,08 g |
| Lécithine de soja |
1,0 g |
| Tween 80 |
2,0 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| pH 7,2 ± 0,2 |
|
| Suppléments (pour 500 mL de milieu de base) |
| Polymyxine-B-sulfate |
5,0 mg |
| Ceftazidime |
10,0 mg |
| Acriflavine |
2,5 mg |
| Eau distillée |
5,0 mL |
Milieu complet:
Suspendre les ingrédients du milieu de base dans 1,0 L d'eau distillée et ajuster au besoin le pH. Porter à ébullition pour dissoudre complètement. Stériliser à 121oC pendant 15 minutes. Laisser refroidir à 50oC. Ajouter aseptiquement la solution de suppléments à 500 mL de base de gélose refroidie (doubler la quantité pour 1,0 L). Mélanger soigneusement et répartir. Entreposer au réfrigérateur dans l'obscurité (l'acriflavine peut être photo-oxydé et former des composés inhibiteurs pour les Listeria spp. ).
Solution de supplément : Ajouter les ingrédients du supplément à 5,0 mL d'eau distillée. Stériliser par filtration
| Park and Sanders' Enrichment Broth [Bouillon d'enrichissement Park et Sanders] |
| Milieu de base (base de bouillon Brucella) |
| Hydrolysât pancréatique de caséine |
10,0 g |
| Hydrolysât peptique de tissus animaux |
10,0 g |
| Chlorure de sodium (NaCl) |
5,0 g |
| Extrait de levure |
2,0 g |
| Glucose |
1,0 g |
| Pyruvate de sodium (facultatif) |
0,25 g |
| Sodium bisulfite (NaHSO3) |
0,1 g |
| Eau distillée |
950 mL |
| pH 7,0 ± 0,2 |
|
| Suppléments |
| Sang de cheval lysé |
50,0 mL |
| Supplément A |
| Vancomycine |
0,01 g |
| Triméthoprime lactate |
0,01 g |
| Eau distillée |
5,0 mL |
| Supplément B |
|
| Céfopérazone sodique |
0,032 g |
| Cycloheximide (facultatif) |
0,1g |
| Eau distillée |
5,0 mL |
Milieu complet:
Ajouter les ingrédients du milieu de base à 950 mL d'eau distillée. Mélanger soigneusement. Porter à ébullition pour dissoudre complètement. Stériliser à 121oC pendant 15 minutes. Refroidir à 25oC. Ajouter aseptiquement le sang de cheval lysé et 5,0 mL de supplément A et mélanger soigneusement. Répartir aseptiquement 100 mL dans des flacons de 250 mL. Ajouter aseptiquement 0,5 mL de supplément B à 100 mL de milieu.
Supplément A : Ajouter les ingrédients du supplément dans 5,0 mL d'eau distillée, mélanger soigneusement et stériliser par filtration.
Supplément B : Ajouter les ingrédients du supplément dans 5,0 mL d'eau distillée, mélanger soigneusement et stériliser par filtration .
| Note: Si les échantillons ont été soumis à un stress, particulièrement par la congélation, incuber le 100 mL de milieu inoculé pendant 3 à 4 heures avant d'ajouter 0,5 mL de supplément B. |
| Penicillin-Streptomycin Solution [Solution de pénicilline-streptomycine] |
| Milieu de base |
| Pénicilline G |
500,000 UI |
| Streptomycine |
500,000 µg |
| Eau distillée |
100 mL |
Milieu complet:
Dissoudre les antibiotiques dans l'eau distillée et stériliser par filtration. Conserver au réfrigérateur.
Pour V. cholerae, utiliser une solution de pénicilline G-streptomycine sulfate disponible dans le commerce. Ajouter 500 mL de solution pour 500 mL de milieu. Conserver à -20oC.
| Peptone (1.0%) Salt Diluent [Diluant peptoné (1,0%) avec sel] |
| Milieu de base |
| Peptone |
10,0 g |
| Chlorure de sodium (NaCl) |
5,0 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| pH 7,2 ± 0,2 |
|
Milieu complet:
Ajouter les ingrédients du milieu de base à 1,0 L d'eau distillée. Mélanger soigneusement et répartir. Stériliser à 121oC pendant 15 minutes.
| Peptone Salt Nitrate Broth [Bouillon peptoné avec sel et nitrate] |
| Milieu de base |
| Peptone |
10,0 g |
| Chlorure de sodium (NaCl) |
30,0 g |
| Nitrate de potassium (KNO3) |
1,0 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| pH 7,6 ± 0,2 |
|
Milieu complet:
Ajouter les ingrédients du milieu de base à 1,0 L d'eau distillée. Mélanger soigneusement et répartir. Stériliser à 121oC pendant 15 minutes.
| Peptone (0.1%) Water Diluent [Diluant à l'eau peptonée (0,1%] |
| Milieu de base |
| Peptone |
1,0 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| pH 7,0 ± 0,2 |
|
Milieu complet:
Ajouter 1,0 g de peptone à 1,0 L d'eau distillée. Mélanger soigneusement et distribuer suffisamment de diluant dans des bouteilles de dilution ou des éprouvettes pour obtenir le volume requis après stérilisation. Stériliser à 121oC pendant 15 minutes.
| Peptone/Tween 80 diluent [Diluant peptone/Tween 80] |
| Milieu de base |
| Peptone |
1,0 g |
| Tween 80 |
10,0 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| pH 7,4 ± 0,2 |
|
Milieu complet:
Ajouter les ingrédients du milieu de base à 1,0 L d'eau distillée chaude. Mélanger soigneusement jusqu'à dissolution et distribuer suffisamment de diluant dans des bouteilles de dilution ou des éprouvettes pour obtenir le volume requis après stérilisation. Stériliser à 121oC pendant 15 minutes.
| Peroxidase Substrate Solution (ABTS) (2,2 O -Azino-di-[3-ethyl benzthiazoline sulfonate (6)] (ABTS substrate) [Solution de substrat à la peroxidase (ABTS)(2,2-Azino-di-[3-sulfonate déthyl benzthiazoline (6)] (substrat ABTS)] |
| Milieu de base |
| ABTS |
10 mg |
| Acide citrique (0,05 M) |
10 mL |
| Peroxyde d'hydrogène, 30% (H2O2) |
30 µL |
Milieu complet:
Préparer 5 minutes avant de l'utiliser. Suffisant pour une microplaque de 96.puits.
| Peroxidase Substrate Solution (4-chloro-1- naphthol) for Membrane ELISA [Solution de substrat à la peroxidase (4-chloro-1- naphthol) pour membrane ELISA] |
| Milieu de base |
| Solution A |
|
| 4-Chloro-1-naphthol |
60,0 mg |
| Méthanol (froid) |
20 mL |
| Solution B |
|
| Peroxyde d'hydrogène, 30% (H2O2) |
60 µL |
| Solution saline tris-tamponnée (TBS) |
100 mL |
Milieu complet:
Solution A : Dissoudre 4-chloro-1-naphthol dans du méthanol froid. Conserver à -20oC.
Solution B : Mélanger les deux ingrédients ensemble à la température ambiante.
Solution complète : Mélanger la solution A froide avec la solution B à température ambiante immédiatement avant l'utilisation.
| Phenol Red Carbohydrate Broth(0.5%) [Bouillon au rouge de phénol et aux glucides (0,5%] |
| Milieu de base |
| Trypticase or protéose peptone no. 3 |
10,0 g |
| Chlorure de sodium (NaCl) |
5,0 g |
| Extrait de boeuf (facultatif) |
1,0 g |
| Rouge de phénol (ou 7,2 mL d'une solution de rouge de phénol à 0,25%) |
0,018 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| pH 7,4 ± 0,2 |
|
| Supplément |
|
| Glucide requis pour l'épreuve |
5,0 g |
Milieu complet:
Ajouter les ingrédients du milieu de base à 1,0 L d'eau distillée. Dissoudre 5,0 g du glucide requis dans ce bouillon de base. Mélanger soigneusement et répartir dans des éprouvettes contenant des tubes de fermentation inversés. Stériliser à 121oC pendant 15 minutes.
| Phenol Red Sorbitol Agar with MUG [Gélose au sorbitol et au rouge de phénol avec MUG] |
| Milieu de base |
| Extrait de boeuf |
1,0 g |
| Hydrolysât enzymatique de tissus animaux |
10,0 g |
| Chlorure de sodium (NaCl) |
5,0 g |
| Rouge de phénol |
0,018 g |
| D-sorbitol |
20,0 g |
| 4-méthylumbélliferyl- β -D-glucuronide (MUG) (ou supplément MUG) |
0,05 g |
| Gélose |
20,0 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| pH 6,8 - 6,9 |
|
Milieu complet:
Ajouter les ingrédients du milieu de base à 1,0 L d'eau distillée. Porter à ébullition pour dissoudre complètement. Stériliser à 121oC pendant 15 minutes. Refroidir et répartir (boîtes épaisses)
| Phosphate Buffer(Butterfield's) [Solution tampon au phosphate (Butterfield)] |
| Solution-mère |
| Phosphate monopotassique (KH2PO4) |
34,0 g |
| Eau distillée |
500 mL |
| pH à 7,2 |
|
Milieu complet:
Ajuster le pH à 7,2 avec du NaOH 1N et porter le volume à 1,0 L avec de l'eau distillée. Stériliser à 121oC pendant 15 minutes et conserver au réfrigérateur.
Blancs de dilution :
Prélever 1,25 mL de la solution-mère et porter le volume à 1,0 L avec de l'eau distillée. Distribuer le volume requis et stériliser à 121oC pendant 15 minutes
| Phosphate Buffered Saline (PBS) (pH 7.3-7.4, 0.02 M) [Solution saline tamponnée au phosphate (PBS) pH 7,3-7,4, 0,02M)] |
| Solution-mère 1 |
| Phosphate disodique anhydre, qualité réactif (Na2HPO4) |
28,4 g |
| Chlorure de sodium, qualité réactif (NaCl) |
85,0 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| Le pH est approximativement de 8,2 |
|
| Solution-mère 2 |
|
| Phosphate monosodique monohydrate, qualité réactif (NaH2PO4.H2O) |
27,6 g |
| Chlorure de sodium, qualité réactif (NaCl) |
85,0 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| Le pH est approximativement de 5,6 |
|
Milieu complet :
Préparer des dilutions 1dans 9 de parts aliquotes de chaque solution-mère de façon à obtenir un volume final de 500 mL de la solution 1 diluée et 100 mL de la solution 2 diluée. Utiliser un pH-mètre pour ajuster le pH de la solution 1 diluée à un pH de 7,3-7,4 en ajoutant environ 65,0 mL de la solution 2 diluée. On obtient ainsi une solution saline tamponnée au phosphate 0,02 M.
| Note: Ne pas titrer la solution-tampon au phosphate 0,2 M à un pH de 7,3-7,4 pour la diluer ensuite à une concentration de 0,02 M, car cela fait baisser le pH d'environ 0,25. L'ajout de sel à 0,85 % après l'ajustement du pH entraîne aussi une baisse d'environ 0,2. |
| Phosphate Buffered Saline(PBS for Ridascreen) [Solution saline tamponnée au phosphate (PBS pour Ridascreen)] |
| Milieu de base |
| Phosphate monosodique monohydrate, qualité réactif (NaH2PO4.H2O) |
0,55 g |
| Phosphate disodique anhydre, qualité réactif (Na2HPO4) |
2,85 g |
| Chlorure de sodium (NaCl) |
8,7 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| pH 7,4 |
|
Milieu complet:
Dissoudre dans 500 mL d'eau distillée. Ajuster le pH à 7,4. Ajouter de l'eau distillée pour compléter à un litre.
| Plate Count Agar (PCA) [Gélose pour numération en plaque] |
| Milieu de base |
| Tryptone |
5,0 g |
| Glucose |
1,0 g |
| Extrait de levure |
2,5 g |
| Gélose |
15,0 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| pH 7,0 ± 0,2 |
|
Milieu complet:
Ajouter les ingrédients du milieu de base à 1,0 L d'eau distillée. Porter à ébullition pour dissoudre tous les ingrédients. Répartir dans les contenants appropriés et stériliser à 121oC pendant 15 minutes. Pour les produits laitiers stables à la température ambiante, l'addition de 1,0 mL de produit restérilisé au milieu tempéré avant la distribution dans les boîtes de Pétri peut aider à la récupération des microorganismes.
| Plate Count Agar with Chloramphenicol [Gélose pour numération en plaque avec chloramphénicol] |
| Milieu de base |
| Gélose pour numération en plaque (voir ci-dessus) |
1,0 L |
| Chloramphénicol |
100,0 mg |
| pH 7,0 ± 0,2 |
|
Milieu complet:
Ajouter les ingrédients du milieu de base de la gélose pour numération en plaque à 1,0 L d'eau distillée.. Porter à ébullition pour dissoudre tous les ingrédients et ajouter 100,0 mg de chloramphénicol. Mélanger soigneusement. Répartir dans des contenants appropriés et stériliser à 121oC pendant 15 minutes.
| Polymyxin Pyruvate Egg Yolk Mannitol Bromthymol Blue Agar ( PEMBA MEDIUM) [Gélose polymyxine, pyruvate, jaune d'oeuf, mannitol, bleu de bromothymol (milieu PEMBA)] |
| Milieu de base (Disponible chez Oxoid sous le nom de « Gélose sélective pour Bacillus cereus ») |
| Peptone |
1,0 g |
| D-mannitol |
10,0 g |
| Sulfate de magnésium heptahydrate (MgSO4.7H2O) |
0,1g |
| Chlorure de sodium (NaCl) |
2,0 g |
| Phosphate disodique (Na2HPO4) |
2,5 g |
| Phosphate monopotassique (KH2PO4) |
0,25 g |
| Bleu de bromothymol |
0,12 g |
| Pyruvate de sodium (C3H3O3Na) |
10,0 g |
| Gélose |
18,0 g |
| Eau distillée |
940 mL |
| pH 7,4 ± 0,2 |
|
| Suppléments |
|
| Solution de polymyxine (10,000 unités/mL) |
10,0 mL |
| Émulsion de jaune d'oeuf 50% |
50,0 mL |
Milieu complet:
Ajouter les ingrédients du milieu de base à 940 mL d'eau distillée. Chauffer jusqu'à ébullition pour dissoudre complètement. Ajuster le pH à 7,4. Stériliser à 121oC pendant 15 minutes. Laisser refroidir à 50-55oC. Ajouter de façon aseptique 10,0 mL de la solution de polymyxine B pré chauffée (50-55oC) et 50,0 mL de l'émulsion de jaune d'œuf pré chauffé (50-55oC) à la suspension du milieu de base tempérée (50-55oC). Mélanger soigneusement mais doucement et répartir dans des boîtes de Pétri. (Si une émulsion commerciale de jaune d'œuf est utilisée, ajouter le jaune d'œuf à une concentration finale de 2,5 %).
Solution de polymyxine B : Stériliser la solution par filtration.
Émulsion de jaune d'oeuf (50 %) (disponible dans le commerce comme un enrichissement et contient habituellement environ 50 % de jaune d'oeuf): Faire tremper des œufs frais propres dans de l'alcool à 70 % pendant 15 minutes. Séparer les jaunes d'œuf de façon aseptique et mélanger avec une quantité égale de solution saline pendant environ cinq minutes sur un agitateur magnétique à basse vitesse (ne pas chauffer).
| Potato Dextrose Agar (PDA) [Gélose de pomme de terre et dextrose] |
| Milieu de base |
| Pommes de terre |
200,0 g |
| Dextrose |
20,0 g |
| Gélose |
20,0 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| pH 5,6 ± 0,2 |
|
Milieu complet:
Faire bouillir 200 g de pommes de terre tranchées non pelées dans 1,0 L d'eau distillée pendant 30 minutes. Filtrer au moyen d'un coton et garder l'effluent. Ajouter les autres ingrédients à l'infusion de pommes de terre et chauffer jusqu'à ébullition pour dissoudre complètement.
Ou ajouter 39 g d'un milieu déshydraté commercial et 5,0 g de gélose à 1,0 L d'eau distillée. Porter à ébullition pour dissoudre complètement. Stériliser à 121oC pendant 15 minutes et répartir dans des boîtes de Pétri stériles. Il ne faut pas faire refondre le milieu plus d'une fois
| Potato Dextrose Agar with Chloramphenicol [Gélose de pomme de terre et dextrose avec chloramphénicol] |
| Milieu de base |
| Gélose PDA (voir ci-dessus) |
1,0 L |
| Chloramphénicol |
100,0 mg |
| pH 5,6 ± 0,2 |
|
Milieu complet:
Préparer 1,0 L de gélose PDA et ajouter 100,0 mg de chloramphénicol. Mélanger soigneusement et stériliser à 121oC pendant 15 minutes. Distribuer dans des boîtes de Pétri.
| Potato Dextrose - Salt Agar [Gélose de pomme de terre et dextrose avec sel] |
| Milieu de base |
| Gélose PDA (voir ci-dessus) |
1,0 L |
| Chlorure de sodium (NaCl) |
75,0 g |
| pH 5,6 ± 0,2 |
|
Milieu complet:
Préparer 1,0 L de gélose PDA et ajouter 75,0 g de chlorure de sodium. Mélanger soigneusement et stériliser à 121oC pendant 15 minutes. Distribuer dans des boîtes de Pétri stériles.
| Potato Dextrose Agar (Acidified) (PDA) [Gélose de pomme de terre et dextrose (acidifié)] |
| Milieu de base |
| Gélose PDA (voir ci-dessus) |
1,0 L |
| Supplément |
| Acide tartarique à 10% |
16,0 mL |
| pH 3,5 ± 0,1 |
|
Milieu complet:
Préparer 1,0 L de PDA et stériliser à 121oC pendant 15 minutes. Laisser refroidir à 45-50oC. Ajouter de façon aseptique 16,0 mL d'acide tartarique stérile à 10% et mélanger soigneusement. Distribuer dans des boîtes de Pétri stériles. Ne pas faire réchauffer le milieu acidifié car la gélose sera hydrolysée.
| Presence-Absence Broth [Bouillon présence-absence] |
| Milieu de base |
| Extrait de boeuf |
3,0 g |
| Peptone |
5,0 g |
| Lactose |
7,46 g |
| Tryptose |
9,83 g |
| Phosphate dipotassique (K2HPO4) |
1,35 g |
| Phosphate monopotassique (KH2PO4) |
1,35 g |
| Chlorure de sodium (NaCl) |
2,46 g |
| Sodium lauryl (dodécyl) sulfate (C12H25O4SNa) |
0,05 g |
| Violet de bromocrésol |
0,0085 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| pH 6,8 ± 0,2 |
|
Milieu complet:
Ajouter les ingrédients du milieu de base (triple concentration) à 1,0 L d'eau distillée. Chauffer doucement pour dissoudre complètement et répartir 50,0 mL dans des bouteilles de dilution de 250 mL. Stériliser à 121oC pendant 12 minutes, pour un temps total d'autoclave ne dépassant pas 30 minutes. Refroidir.
| Preston Agar (Campylobacter Selective Medium) [Gélose Preston (Milieu sélectif pour Campylobacter)] |
| Milieu de base |
| Extrait de boeuf |
10,0 g |
| Peptone |
10,0 g |
| Chlorure de sodium (NaCl) |
5,0 g |
| Gélose |
12,0 g |
| Eau distillée |
940 mL |
| pH 7,5 ± 0,2 |
|
| Supplément d'antibiotiques |
|
| Polymyxine B |
5000,0 UI |
| Rifampicine |
0,01 g |
| Triméthoprime lactate |
0,01 g |
| Cycloheximide |
0,1 g |
| Acétone : eau distillée (50:50) |
10 mL |
| Supplément |
|
| Sang de cheval lysé |
50,0 mL |
Milieu complet:
Ajouter les ingrédients du milieu de base à 940 mL d'eau distillée. Mélanger soigneusement. Porter à ébullition pour dissoudre complètement. Stériliser à 121oC pendant 15 minutes. Laisser refroidir à 45-50oC. Ajouter de façon aseptique 50,0 mL de sang de cheval lysé et 10,0 mL du supplément d'antibiotique. Mélanger soigneusement et répartir dans des boîtes de Pétri stériles.
Supplément d'antibiotiques : Ajouter les ingrédients antibiotiques à 10,0 mL d'une solution 50:50 d'acétone et d'eau distillée et stériliser par filtration.
| Pseudomonas-CFC Agar [Gélose Pseudomonas-CFC] |
| Milieu de base |
| Hydrolysât de gélatine |
16,0 g |
| Gélose |
11,0 g |
| Hydrolysât de caséine |
10,0 g |
| Sulfate de potassium (K2SO4) |
10,0 g |
| Chlorure de magnésium hexahydrate (MgCl2.6H20) |
1,4 g |
| Glycérol |
10,0 mL |
| Eau distillée |
990 mL |
| Supplément sélectif CFC |
|
| Céphaloridine |
0,05 g |
| Fucidine |
0,01 g |
| Cétrimide |
0,01 g |
| Eau distillée |
10 mL |
Milieu complet:
Ajouter les ingrédients du milieu de base à 990 mL d'eau distillée. Mélanger soigneusement et chauffer doucement jusqu'à ébullition. Stériliser à 121oC pendant 15 minutes. Laisser refroidir à 45-50oC. Ajouter de façon aseptique le supplément sélectif CFC stérile. Mélanger soigneusement et distribuer dans des boîtes de Pétri stériles.
Supplément sélectif CFC : Ajouter les ingrédients sélectifs à l'eau distillée et porter le volume à 10,0 mL. Mélanger soigneusement et stériliser par filtration.
| Pseudomonas-CN Agar [Gélose Pseudomonas-CN] |
| Milieu de base |
| Hydrolysât de gélatine |
16,0 g |
| Gélose |
11,0 g |
| Hydrolysât de caséine |
10,0 g |
| Sulfate de potassium (K2SO4 ) |
10,0 g |
| Chlorure de magnésium hexahydrate (MgCl2.6H20) |
1,4 g |
| Glycérol |
10,0 mL |
| Eau distillée |
990 mL |
| Supplément sélectif CN (pour 500 mL de milieu de base) |
|
| Cétrimide |
0,1 g |
| Nalidixate de sodium |
7,5 mg |
| Eau distillée |
1,0 mL |
| Éthanol |
1,0 mL |
Milieu complet:
Ajouter les ingrédients du milieu de base à 990 mL d'eau distillée. Mélanger soigneusement et chauffer doucement jusqu'à ébullition. Stériliser à 121oC pendant 15 minutes. Laisser refroidir à 45-50oC. Ajouter de façon aseptique le supplément sélectif CN stérile. Mélanger soigneusement et distribuer dans des boîtes de Pétri stériles.
| Purple broth base with cellobiose [Bouillon violet de base avec cellobiose] |
| Milieu de base |
| Protéose peptone |
10,0 g |
| Extrait de boeuf |
1,0 g |
| Chlorure de sodium (NaCl) |
5,0 g |
| Violet de bromocrésol |
0,02 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| pH 6,8 ± 0,2 |
|
| Supplément |
|
| Cellobiose |
10,0 g |
Milieu complet:
Ajouter les ingrédients du milieu de base à 1,0 L d'eau distillée. Porter à ébullition pour dissoudre complètement. Ajouter 10,0 g de cellobiose. Mélanger soigneusement. Répartir 10,0 mL dans des éprouvettes et stériliser à 121oC pendant 15 minutes.
|
