Annexe G
Glossaire des milieux
janvier 2006
GLOSSAIRE DES BOUILLONS,GÉLOSES ET AUTRES RÉACTIFS
Section S
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| Sabouraud Dextrose Agar (SDA) [Gélose Sabouraud au dextrose] |
| Milieu de base |
| Dextrose |
40,0 g |
| Peptone |
10,0 g |
| Gélose |
15,0 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| pH 5,6 ± 0,2 |
|
Milieu complet:
Suspendre les ingrédients du milieu de base dans 1,0 L d‘eau distillée. Porter à ébullition pour dissoudre complètement. Stériliser à l'autoclave à 121oC pendant 15 minutes. Ne pas stériliser plus longtemps qu’il le faut. Répartir dans des boîtes de Pétri stériles.
| Safranin (0.5%) [Safranine à 0,5%] |
| Solution de travail |
| Safranine |
0,5 g |
| Eau distillée |
100 mL |
Milieu complet:
Dissoudre 0,5 g de safranine dans 100 mL d’eau distillée.
| Safranin counterstain (Hucker’s) [Safranine contre-colorant, de Hucker] |
| Solution-mère |
| Safranine O (homologuée) |
2,5 g |
| Éthanol (95%) |
100 mL |
| Solution de travail |
| Solution-mère |
10,0 mL |
| Eau distillée |
90,0 mL |
| Saline, physiological [Saline physiologique] |
| Solution de travail |
| Chlorure de sodium (NaCl) |
8,5 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
Milieu complet:
Suspendre le chlorure de sodium dans 1,0 L d’eau distillée. Mélanger pour dissoudre. Répartir dans des contenants de verre appropriés et stériliser à l’autoclave à 121oC pendant 15 minutes.
| Selenite Cystine Broth (SC) [Bouillon sélénite cystine] |
| Milieu de base |
| Tryptone |
5,0 g |
| Lactose |
4,0 g |
| Phosphate disodique (Na2HPO4) |
10,0 g |
| Sélénite de sodium (Na2SeO3) |
4,0 g |
| L-cystine |
0,01 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| pH 7,0 ± 0,2 |
|
Milieu complet:
Suspendre les ingrédients du milieu de base dans 1,0 L d'eau distillée. Chauffer pendant 10 minutes à l’autoclave à la vapeur libre ou jusqu'à ébullition sur une plaque chauffante en faisant tournoyer fréquemment. NE PAS STÉRILISER À L’AUTOCLAVE. Laisser refroidir à 45-50oC. Répartir le milieu dans des contenants de verre appropriés. Utiliser le milieu le jour de la préparation.
| Note: Les sels de sélénium peuvent être tératogènes et il faut les peser sous une hotte. |
| Serum-inositol Medium [Milieu de sérum-inositol] (pour la lyophilisation des cultures) |
| Milieu de base |
| Sérum de veau nouveau-né(stérile) |
9 parties |
| Myo-inositol (50% p/vol) |
1 partie |
Milieu complet:
Mélanger les ingrédients soigneusement.
| Shigella Broth [Bouillon Shigella] (1998. FDA. Bacteriological Analytical Manual, 8 e édition) |
| Milieu de base |
| Tryptone |
20,0 g |
| Phosphate dipotassique (K2HPO4) |
2,0 g |
| Phosphate monopotassique (KH2PO4) |
2,0 g |
| Chlorure de sodium (NaCl) |
5,0 g |
| Glucose |
1,0 g |
| Tween 80 |
1,5 mL |
| Eau distillée |
1,0 L |
| pH 7,0 ± 0,2 |
|
| Supplément |
| Novobiocine |
50 mg |
| Eau distillée |
1,0 L |
Milieu complet:
Suspendre les ingrédients du milieu de base dans 1,0 L d’eau distillée. Porter à ébullition pour dissoudre complètement. Stériliser le milieu de base à l’autoclave à 121o C pendant 15 minutes. Laisser refroidir à 50oC. Ajouter de façon aseptique 2,5 mL de la solution de novobiocine à 225 mL du milieu de base et mélanger soigneusement.
Solution de novobiocine : Suspendre 50 mg de novobiocine dans 1 litre d’eau distillée. Stériliser par filtration (membrane filtrante de 0,45 : m).
| SIM Medium (also known as: Sulfide Indole Motility Medium) [Milieu SIM (aussi connu sous le nom: Milieu sulfite indole motilité] |
| Milieu de base |
| Peptone |
30,0 g |
| Extrait de boeuf |
3,0 g |
| Fer pepton é |
0,2 g |
| Thiosulfate de sodium (Na2S2O3) |
0,025 g |
| Gélose |
3,0 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| pH 7,3 ± 0,2 |
|
Milieu complet:
Suspendre les ingrédients du milieu de base dans 1,0 L d’eau distillée. Porter à ébullition pour dissoudre complètement. Répartir 6,5 mL dans des éprouvettes à bouchon vissé et stériliser à 121oC pendant 15 minutes.
| Simmons Citrate Agar [Gélose au citrate de Simmons] |
| Milieu de base |
| Chlorure de sodium (NaCl ) |
5,0 g |
| Sulfate de magnésium (MgSO4.7H2O) |
0,2 g |
| Phosphate d’ammonium (NH4H2PO4) |
1,0 g |
| Phosphate dipotassique (K2HPO4) |
1,0 g |
| Citrate de sodium (Na3C6H507.2H20) |
2,0 g |
| Bleu de bromothymol |
0,08 g |
| Gélose |
15,0 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| pH 6,9 ± 0,2 |
|
Milieu complet:
Suspendre les ingrédients du milieu de base dans 1,0 L d'eau distillée. Porter à ébullition pour dissoudre complètement. Répartir en volumes de 10 mL dans des éprouvettes. Stériliser à l’autoclave à 121oC pendant 15 minutes. Faire refroidir en position inclinée pour obtenir des pentes de gélose avec un culot d'un pouce.
| Skim Milk Medium [Milieu au lait écrémé] |
| Milieu de base |
| Poudre de lait écrémé |
100 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| Solution aqueuse de vert brillant à 0.1% |
20 mL |
| Supplément |
| Vert brillant |
0,1 g |
| Eau distillée |
100 mL |
Milieu complet:
Suspendre la poudre de lait écrémé dans 1,0 L d’eau distillée et mélanger pour dissoudre. Ajouter 20,0 mL d’une solution aqueuse de vert brillant à 0,1 % (p/v) (concentration finale de 0,002 % p/v). Stériliser à l’autoclave à 121oC pendant 15 minutes.
| 0% Sodium Chloride ( NaCl )-peptone Broth [Bouillon peptone-chlorure de sodium à 0%] |
| Milieu de base |
| Peptone |
10,0 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| pH 7,6 |
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Milieu complet:
Suspendre le peptone dans 1,0 L d’eau distillée et mélanger pour dissoudre. Ajuster le pH à 7,6 et répartir en volumes de 4,7 mL dans des éprouvettes. Stériliser à l’autoclave à 121oC pendant 15 minutes.
| Sodium Chloride ( NaCl )-peptone Broth, 3% (also 7% and 10%) [Bouillon peptone-chlorure de sodium à 3% (aussi 7% et 10%] |
| Milieu de base |
| Peptone |
10,0 g |
| Chlorure de sodium (NaCl)* 3% |
30,0 g |
| 7% |
70,0 g |
| 10% |
100,0 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| pH 7,6 |
|
Milieu complet:
Suspendre le peptone dans 1,0 L d’eau distillée et mélanger pour dissoudre. Ajuster le pH à 7,6 et répartir en volumes de 4,7 mL dans des éprouvettes. Stériliser à l’autoclave à 121oC pendant 15 minutes.
*pour 7% et 10%, utiliser respectivement 70 g et 100 g de NaCl.
| Sodium citrate, aqueous (2%) [Diluant au citrate de sodium aqueux à 2%] |
| Milieu de base |
| Citrate trisodique (C6H5O7Na3) |
20,0 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| pH 7,0 ± 0,02 |
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Milieu complet:
Dissoudre 20,0 g de citrate trisodique dans 1,0 L d’eau distillée. Distribuer en volumes de 99,0 (90,0) mL et stériliser à l’autoclave à 121oC pendant 15 minutes
| Sorbitol - Bile salts Broth [Bouillon au sorbitol et sels biliaires] |
| Milieu de base |
| Phosphate disodique, anhydre (Na2HPO4) |
8,23 g |
| Phosphate monosodique, monohydrate (NaH2PO4 - H2O ) |
1,2 g |
| Chlorure de sodium (NaCl) |
5,0 g |
| Sels biliaires (Difco no 3) |
1,5 g |
| D-sorbitol |
10,0 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| pH |
|
Milieu complet:
Suspendre les ingrédients du milieu de base dans 1,0 L d'eau distillée. Porter à ébullition pour dissoudre complètement. Stériliser à l’autoclave à 121oC pendant 15 minutes.
| Sorbitol MacConkey Agar [Gélose MacConkey au sorbitol] |
| Milieu de base |
| Peptone |
17,0 g |
| Protéose peptone |
3,0 g |
| Sorbitol |
10,0 g |
| Sels biliaires no 3 |
1,5 g |
| Chlorure de sodium (NaCl) |
5,0 g |
| Rouge neutre |
0,03 g |
| Violet de gentiane |
0,001 g |
| Gélose |
15,0 g |
| Eau distillée |
1,.0 L |
| pH 7,1 ± 0,2 |
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Milieu complet:
Suspendre les ingrédients du milieu de base dans 1,0 L d'eau distillée. Porter à ébullition pour dissoudre complètement. Stériliser à l’autoclave à 121oC pendant 15 minutes. Laisser refroidir à 45-50oC. Répartir le milieu dans des boîtes de Pétri stériles.
| Sorbitol MacConkey Agar with BCIG [Gélose MacConkey au sorbitol avec BCIG] |
| Milieu de base |
| Gélose MacConkey au sorbitol (voir ci-dessus) |
1,0 L |
| (BCIG) sel de 5-bromo-4-chloro-3-indolyl- β -D-glucuronide-Na (or -CHX) |
0,1 g |
Milieu complet:
Préparer la gélose MacConkey au sorbitol et ajouter le sel sodique de BCIG. Stériliser à l’autoclave à 121oC pendant 15 minutes. Laisser refroidir à 50oC. Répartir dans des boîtes de Pétri stériles.
| Note: Si l’on utilise du BCIG-CHX, il faut dissoudre ainsi : 0,1 g de BCIG dans 2,5 mL d’éthanol à 95 % et 0,5 mL de NaOH 1N. Chauffer doucement pour dissoudre et ajouter à 1,0 L de gélose MacConkey au sorbitol. |
| Sudan Black B [Noir de Soudan B] |
| Milieu de base |
| Noir de Soudan B |
0,3 g |
| Éthanol, 70% |
100 mL |
Milieu complet:
Dissoudre le noir de soudan B dans l’éthanol à 70 %.
| Sulfite Cycloserine Agar (originally designated EY free Tryptose Sulfite Cycloserine (TSC) Agar) [Gélose de sulfite et cyclosérine] (appelée à l’origine Gélose tryptose, sulfite et cyclosérine (TSC) sans jaune d’oeuf) |
| Milieu de base |
| Tryptose |
15,0 g |
| Soytone |
5,0 g |
| Extrait de levure |
5,0 g |
| Citrate d’ammonium et de fer |
1,0 g |
| Métabisulfite de sodium (Na2S2O5) |
1,0 g |
| Gélose |
20,0 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| pH 7,6 ± 0,2 |
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| Supplément |
| D-cyclosérine (utiliser unepoudre blanche cristalline seulement) |
0,4 g |
| Eau distillée |
10 mL |
Milieu complet:
Suspendre les ingrédients du milieu de base dans 1,0 L d'eau distillée. Porter à ébullition pour dissoudre complètement. Stériliser à l’autoclave à 121oC pendant 15 minutes et laisser refroidir à 45-50oC. Ajouter de façon aseptique 10 mL de la solution de D-cyclosérine à 4% et mélanger soigneusement. Répartir le milieu dans des boîtes de Pétri stériles.
Solution de D-cyclosérine à 4% : Suspendre 0,4 g de D-cycloserine dans 10 mL d’eau distillée. Stériliser par filtration (membrane filtrante de 0,45 : m).
| Note: La base de gélose est disponible dans le commerce chez BD BBL (base de gélose SFP Shihidi Ferguson Perfringens et base de gélose TSC) et chez Oxoid (base de gélose Perfringens). |
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