Annexe G
Glossaire des milieux
février 2006
GLOSSAIRE DES BOUILLONS, GÉLOSES ET AUTRES RÉACTIFS
Section T
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T1N0, T1N1 T1N2, T1N3 Medium - See Tryptone Salt Agar
[Milieu T1N0, T1N1 T1N2, T1N3 - Voir Gélose tryptone et sel]
| Tetracycline, 0.2% stock solution [Tétracycline, solution-mère à 0,2%] |
| Milieu de base |
| Tétracycline |
50, 0 mg |
| Diluant au phosphate de gélatine (voir la formulation) |
25,0 ml |
Milieu complet :
Dissoudre la tétracycline dans le diluant au phosphate de gélatine. Garder à 4oC pendant quatre jours au maximum. Pour un entreposage prolongé, congeler en petites portions. Éviter de recongeler.
| Tetrathionate Brilliant Green Broth (TBG) [Bouillon au tétrathionate et au vert brillant] |
| Milieu de base |
| Peptone/protéose peptone |
5,0 g |
| Sels biliaires |
1,0 g |
| Carbonate de calcium (CaCO3) |
10,0 g |
| Thiosulfate de sodium (Na2S2O3) |
30,0 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| pH 8,4 ± 0,2 |
|
| Suppléments |
| Vert brillant |
1 g |
| Eau distillée |
100 ml |
| Iodure de potassium (KI) |
25,0 g |
| Iode (I2) |
30,0 g |
| Eau distillée |
100 ml |
Milieu complet :
Ajouter les ingrédients du milieu de base à 1,0 L d'eau distillée et chauffer jusqu'à ébullition. Laisser refroidir à 45-50oC. Préparer le milieu complet le jour où il doit être utilisé. Ajouter de façon aseptique 1,0 ml de la solution de vert brillant à 1% et 20,0 ml de la solution d'iode à un litre de milieu de base. Mélanger soigneusement et répartir aseptiquement. Ne pas chauffer le milieu après avoir ajouté l'iode.
Solution de vert brillant (1% p/v) : Dissoudre le vert brillant dans 100 ml d'eau distillée.
Solution d'iode : Suspendre l'iodure de potassium et l'iode dans 100 ml d'eau distillée. Ne pas chauffer. Il faut préparer la solution d'iode longtemps d'avance parce que l'iode se dissout lentement.
| Thermoacidurans Agar (TA) [Gélose Thermoacidurans] |
| Milieu de base |
| Extrait de levure |
5,0 g |
| Protéose peptone |
5,0 g |
| Dextrose |
5,0 g |
| Phosphate dipotassique (K2HPO4) |
4,0 g |
| Gélose |
20,0 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| pH 5,0 ± 0,2 |
|
Milieu complet :
Suspendre les ingrédients dans 1,0 L d'eau distillée. Chauffer jusqu'à ébullition pour dissoudre complètement. Stériliser à 121oC pendant 15 minutes.
| Thiosulphate Citrate Bile Salts Agar (TCBS) (Oxoid designation is Cholera Medium TCBS) [Gélose au citrate de thiosulfate et aux sels biliaires (TCBS) (désigné chez Oxoid comme Milieu Cholera TCSB)] |
| Milieu de base |
| Peptone |
10,0 g |
| Extrait de levure |
5,0 g |
| Citrate de sodium |
10,0 g |
| Thiosulfate de sodium.5 H2O (Na2S2O3•5 H2O) |
10,0 g |
| Chlorure de sodium (NaCl) |
10,0 g |
| Poudre Ox-gall |
5,0 g |
| Citrate ferrique (FeC6H5O7) |
1,0 g |
| Cholate de sodium |
3,0 g |
| Sucrose |
20,0 g |
| Solution de bleu de thymol (0,2%) |
20,0 ml |
| Solution de bleu de bromothymol (0,2%) |
20,0 ml |
| Gélose |
15,0 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| pH 8,6 ± 0,2 |
|
Milieu complet :
Ajouter les ingrédient de base à 1,0 L d'eau distillée. Chauffer jusqu'à ébullition pour dissoudre complètement. NE PAS STÉRILISER À L'AUTOCLAVE. Refroidir à 45-50oC et répartir.
| Toluidine Blue DNA Agar [Gélose au bleu de toluidine et à l'ADN] |
| Milieu de base |
| Acide désoxyribonucléique (ADN) 1 |
0,3 g |
| Chlorure de calcium (CaCl2) |
1,1 mg |
| Chlorure de sodium (NaCl) |
10,0 g |
| Bleu de toluidine O2 |
0,08 g |
| Gélose |
10,0 g |
| Tampon Tris 0,05M, pH 9,0 (voir ci-dessous) |
1,0 L |
Milieu complet :
Ajouter tous les ingrédients de base, sauf le bleu de toluidine 0, au tampon Tris et faire bouillir pour dissoudre l'ADN et la gélose. Ajouter le bleu de toluidine 0 à la solution et répartir en volumes de 50 à 100 ml dans des fioles ou des bouteilles. Sceller hermétiquement. Il n'est pas nécessaire de stériliser. Conserver à la température de la pièce et à l'obscurité. Le milieu est stable à la température de la pièce pendant au moins 4 mois et conserve ses propriétés même après avoir été fondu plusieurs fois.
Note : 1 Il faut vérifier toutes les sources d'ADN en utilisant le liquide surnageant bouilli d'une culture de S. aureus productrice de Tnase de 24 heures en bouillon BHI. On considérera que l'ADN est adéquat si l'on observe une zone d'hydrolyse de ≥ 8,0 mm avec une portion aliquote de 5,0 ml de liquide surnageant bouilli après 4 heures d'incubation à 35oC.
2 Le bleu de toluidine 0 doit être comparé à un étalon convenable avant de l'utiliser avec des échantillons inconnus car l'efficacité du colorant varie selon le fabricant. |
| Trimethylamine N-oxide (TMAO) Medium [Milieu triméthylamine N-oxyde] |
| Milieu de base |
| Peptone |
10,0 g |
| Extrait de boeuf |
10,0 g |
| Chlorure de sodium (NaCl) |
5,0 g |
| Extrait de levure |
1,0 g |
| Triméthylamine N-Oxide (TMAO) dihydraté |
1,0 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| Gélose |
2,0 g |
| pH 7,5 ± 0,2 |
|
Milieu complet :
Dissoudre tous les ingrédients, sauf la gélose, dans 1,0 L d'eau distillée. Ajouter la gélose et chauffer pour dissoudre. Répartir des volumes de 4,0 ml dans des éprouvettes de 13 x 100 mm munies d'un bouchon qui visse. Stériliser à 121oC pendant 15 minutes. Laisser refroidir les éprouvettes debout.
| 2,3,5, Triphenyltetrazolium Chloride (TTC) Solution, 1% [Solution de chlorure de 2,3,5, triphényltétrazolium à 1 %] |
| Milieu de base |
| Chlorure de 2,3,5, triphényltétrazolium (TTC) |
1,0 g |
| Eau distillée |
100,0 ml |
Milieu complet :
Suspendre le TTC dans 100 ml d'eau distillée. Stériliser par filtration. Distribuer aseptiquement dans des contenants. Conserver au réfrigérateur.
Pour le TSA-TCC, ajouter aseptiquement 10 ml à 1 L de TSA stérilisé et refroidi et mélanger soigneusement. Distribuer dans des boîtes de Pétri.
Pour la solution de coloration de TTC à 0,1%, ajouter 10 ml de TTC à 1% à 90 ml d'eau distillée et mélanger soigneusement.
| Triple Sugar Iron Agar (TSI) [Gélose trois sucres-fer] |
| Milieu de base |
| Extrait de boeuf |
3,0 g |
| Extrait de levure |
3,0 g |
| Peptone |
15,0 g |
| Protéose peptone |
5,0 g |
| Lactose |
10,0 g |
| Sucrose |
10,0 g |
| Dextrose |
1,0 g |
| Sulfate ferreux (FeSO4•7H2O) |
0,2 g |
| Chlorure de sodium (NaCl) |
5,0 g |
| Thiosulfate de sodium (Na2S2O3) |
0,3 g |
| Gélose |
12,0 g |
| Rouge de phénol |
0,024 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| pH 7,4 ± 0,2 |
|
Milieu complet :
Suspendre les ingrédients de base dans 1,0 L d'eau distillée et chauffer jusqu'à ébullition pour dissoudre complètement. Répartir des volumes de 8,0 ml dans les éprouvettes et stériliser à 121oC pendant 15 minutes. Laisser refroidir les éprouvettes en position inclinée pour former des culots profonds.
| Triple Sugar Iron NaCl Agar [Gélose trois sucres-fer-NaCl] |
| Milieu de base |
| Gélose TSI ingrédients de base déshydratés |
65,0 g |
| Chlorure de sodium (NaCl) |
25,0 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| pH 7,4 ± 0,2 |
|
Milieu complet :
Suspendre les ingrédients de base dans 1,0 L d'eau distillée et chauffer jusqu'à ébullition pour siddoudre complètement. Répartir des volumes de 8,0 ml dans les éprouvettes et stériliser à 121oC pendant 15 minutes. Laisser refroidir les éprouvettes en position inclinée pour former des culots profonds
| Tris Buffer, 0.05M, pH 9.0 [Solution-tampon tris, 0,05 M, pH 9,0] |
| Milieu de base |
| Tris (hydroxyméthyl) aminométhane (P.F. 121,14) |
6,06 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| pH 9,0 |
|
Milieu complet :
Dissoudre le tris (hydroxyméthyl) aminométhane (PF 121,14) dans 1,0 L d'eau distillée. Ajuster le pH à 9,0 avec du HCl 0,2N en utilisant une électrode.
| Tris-buffered Saline (TBS) (pH 7.5) [Solution saline tris-tamponnée (pH 7,5)] |
| Milieu de base |
| Tris (hydroxyméthyl) aminométhane |
2,42 g |
| Chlorure de sodium ( NaCl ) |
29,24 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| pH 7,5 |
|
Milieu complet :
Dissoudre le tris (hydroxyméthyl) aminométhane dans 1,0 L d'eau distillée. Ajuster le pH à 9,0 avec du HCl 0,2N en utilisant une électrode.
| Tris-buffered Saline (TBS) with 1% Gelatin [Solution saline tris-tamponnée avec gélatine à 1%] |
| Milieu de base |
| Gélatine |
1,0 g |
| Solution saline tris-tamponnée, pH 7.5 (voir ci-dessus) |
100 ml |
Milieu complet :
Chauffer le TBS à 40oC. Ajouter la gélatine et mélanger pour dissoudre. Laisser refroidir à la température de la pièce avant d'utiliser.
| Tris-buffered Saline (TSB) with 3% Gelatin [Solution saline tris-tamponnée avec gélatine à 3%] |
| Milieu de base |
| Gélatine |
3,0 g |
| Solution saline tris-tamponnée, pH 7.5 (voir ci-dessus) |
100 ml |
Milieu complet :
Chauffer le TBS à 40oC. Ajouter la gélatine et mélanger pour dissoudre. Laisser refroidir à la température de la pièce avant d'utiliser.
| Tris-buffered Saline (TBS) - Tween [Solution saline tris-tamponnée - Tween] |
| Milieu de base |
| Tween 20 |
50 µL |
| Solution saline tris-tamponnée, pH 7.5 (voir ci-dessus) |
100 ml |
Milieu complet :
Suspendre le tween 20 dans 100 ml de TBS et mélanger pour dissoudre.
| Trypsin-EDTA Solution, 1X [Solution de trypsine-EDTA, 1X] |
| Milieu de base |
| Trypsine (1:250) |
0,05 g |
| EDTA, sel disodique (C10H14O8N2Na2 2H2O) |
0,02 g |
| Chlorure de sodium (NaCl), 0,9% |
100 ml |
Milieu complet :
Dissoudre la trypsine et l'EDTA dans le diluant au NaCI. Stériliser par filtration.
| Note : 1 g de trypsine (1:250) absorbera 250 g de substrat de caséine dans des conditions standard. |
| Trypsin Solutions [Solutions de trypsine] |
| Milieu de base |
| Solution de trypsine à 1% |
| Trypsine |
200 mg |
| Eau distillée |
20,0 ml |
| Solution de trypsine à 1,4% |
| Trypsine |
280 mg |
| Phosphate de gélatine |
20,0 ml |
Milieu complet :
Solution à 1% : Dissoudre 200 mg dans 20,0 ml d'eau distillée. Ne pas conserver.
Solution à 1,4% : Dissoudre 280 mg dans 20,0 ml de diluant de phosphate de gélatine. Filtrer au moyen d'une membrane de 0,45 um. Filtrer sous vide pour désaérer partiellement le filtrat.
| Note : Dans les compositions des milieux suivants, les mots tryptone, tryptique ou trypticase peptone font référence à hydrolysât pancréatique de caséine et les mots peptone de soja, soja ou phyto peptone font référence à hydrolysât papaïque de farine de soja. |
| Trypticase Peptone Glucose Yeast Extract (TPGY) Broth [Bouillon de trypticase-peptone-glucose et extrait de levure (TPGY)] |
| Milieu de base |
| Trypticase a |
50,0 g |
| Peptone |
5,0 g |
| Glucose |
4,0 g |
| Extrait de levure |
20,0 g |
| Thioglycolate de sodium (C2H3O2SNa) |
1,0 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| pH 7,2 ± 0,2 |
|
a Fabriqué par Oxoid, sous le nom « Special Peptone L72 ».
Milieu complet :
Ajouter les ingrédients du milieu de base à 1,0 L d'eau distillée chaude, laisser refroidir et ajuster le pH. Distribuer des volumes de 21,0 ml dans des éprouvettes de 20 x 150 mm dotées d'un bouchon qui visse. Stériliser à 121oC pendant 10 minutes. Si le milieu est conservé plus de 12 heures, il faut alors le désaérer à 100oC pendant 10 minutes et le laisser refroidir avant de l'utiliser.
| Tryptic Soy Agar (TSA) (Soybean Casein Digest Agar) (ATCC Medium 77) [Gélose trypticase soja(TSA) (Gélose soybean casein digest) (ATCC Milieu 77)] |
| Milieu de base |
| Tryptone |
15,0 g |
| Peptone de soja |
5,0 g |
| Chlorure de sodium (NaCl) |
5,0 g |
| Gélose |
15,0 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| pH 7,3 ± 0,2 |
|
Milieu complet :
Ajouter les ingrédients du milieu de base à 1,0 L d'eau distillée. Chauffer jusqu'à ébullition en agitant fréquemment pour dissoudre les ingrédients. Ne pas surchauffer. Stériliser à 121oC pendant 15 minutes.
| Trypticase Soy Broth (TSB) (Soybean Casein Digest Broth) [Bouillon de trypticase soja (TSB) (Bouillon soybean casein digest)] |
| Milieu de base |
| Tryptone |
17,0 g |
| Peptone de soja |
3,0 g |
| Dextrose |
2,5 g |
| Chlorure de sodium (NaCl) |
5,0 g |
| Phosphate dipotassique ( K2HPO4) |
2,5 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| pH 7,3 ± 0,2 |
|
Milieu complet :
Ajouter les ingrédients du milieu de base à 1,0 L d'eau distillée. Chauffer jusqu'à ébullition en agitant fréquemment pour dissoudre les ingrédients. Stériliser à 121oC pendant 15 minutes.
| Tryptic Soy Broth (TSB) with Glycerol (extra NaCl and without dextrose) [Bouillon trypticase-soja (TSB) avec glycérol (additionné de NaCl et sans dextrose)] |
| Milieu de base |
| Tryptone |
17,0 g |
| Peptone de soja |
3,0 g |
| Chlorure de sodium (NaCl) |
15,0 g |
| Phosphate dipotassique (K2HPO4) |
2,5 g |
| Glycérol |
240 ml |
| Eau distillée |
760 ml |
| pH 7,3 ± 0,2 |
|
Milieu complet :
Ajouter les ingrédients du milieu de base à 1,0 L d'eau distillée. Chauffer jusqu'à ébullition en agitant fréquemment pour dissoudre les ingrédients. Répartir et stériliser à 121oC pendant 15 minutes.
| Tryptic Soy-Fast Green Agar (TSFA) [ Gélose de trypticase soja et vert rapide] |
| Milieu de base |
| Tryptone |
17,0 g |
| Peptone de soja |
3,0 g |
| Chlorure de sodium (NaCl) |
5,0 g |
| Vert rapide FCF |
0,25 g |
| Gélose |
1 5,0 g |
| Phosphate dipotassique ( K2HPO4 ) |
2,5 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| pH 7,3 ± 0,2 |
|
Milieu complet :
Suspendre les ingrédients du milieu de base dans 1,0 l d'eau distillée. Chauffer jusqu'à ébullition en agitant fréquemment pour dissoudre tous les ingrédients. Stériliser à 121oC pendant 15 minutes.
| Tryptic Soy-Magnesium Sulfate Agar (TSAM) [Gélose de trypticase soja avec sulfate de magnésium] |
| Milieu de base |
| Tryptone |
15,0 g |
| Peptone de soja |
5,0 g |
| Chlorure de sodium (NaCl) |
5,0 g |
| Sulfate de magnésium heptahydraté (MgSO47H2O) |
1,5 g |
| Gélose |
1 5,0 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| pH 7,3 ± 0,2 |
|
Milieu complet :
Suspendre les ingrédients du milieu de base dasn 1,0 L d,eau distillée. Chauffer jusqu'à ébullition en agitant fréquemment pour dissoudre les ingrédient. Stériliser à 121oC pendant 15 minutes.
| Note : La gélose trypticase soja est disponible dans le commerce et l'on peut y ajouter du MgSO4 A7H2 O (1,5 g/L). |
| Trypticase Soy Agar with 0.01% TTC [Gélose trypticase de soja avec TTC à 0,01% ] |
| Milieu de base |
| Gélose trypticase de soja (voir ci-dessus) |
40,0 g |
| Solution de TTC à 1% (chlorure de 2,3,5-triphényltétrazolium) |
10 ml |
| Eau distillée |
990 ml |
| pH 7,3 ± 0,2 |
|
Milieu complet :
Suspendre les ingrédient du milieu de base dans 990 ml d'eau distillée. Chauffer jusqu'à ébullition en agitant fréquemment pour dissoudre tous les ingrédients. Stériliser à 121oC pendant 15 minutes. Ajouter aseptiquement la solution de TTC à 1% et mélanger soigneusement. Distribuer dans les boîtes.
| Trypticase Soy Agar with 0.6% Yeast Extract (TSA-YE) [Gélose de trypticase soja avec extrait de levure à 0,6 %] |
| Milieu de base |
| Gélose trypticase soja (voir ci-dessus) |
40,0 g |
| Extrait de levure |
6,0 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| pH 7,3 ± 0,2 |
|
Milieu complet :
Suspendre les ingrédients du milieu de base dans 1,0 L d'eau distillée. Chauffer jusqu'à ébullition en agitant fréquemment pour dissoudre tous les ingrédients. Distribuer dans des éprouvettes ou des flacons et stériliser à 121oC pendant 15 minutes. Laisser dans les éprouvettes ou verser dans des boîtes de Pétri stériles.
| Trypticase Soy Broth with 0.6% Yeast Extract (TSB-YE) [Bouillon de trypticase soja avec extrait de levure à 0,6 %] |
| Milieu de base |
| Bouillon de trypticase soja (voir ci-dessus) |
30,0 g |
| Extrait de levure |
6,0 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| pH 7,3 ± 0,2 |
|
Milieu complet :
Suspendre les ingrédients du milieu de base dans 1,0 L d'eau distillée. Chauffer jusqu'à ébullition en agitant fréquemment pour dissoudre tous les ingrédients. Distribuer et stériliser à 121oC pendant 15 minutes.
| Tryptone Broth (1%) ) [Bouillon Tryptone (1%)] |
| Milieu de base |
| Tryptone |
10,0 g |
| Eau distillée |
1.0 L |
| pH to 7,0 ± 0,2 |
|
Milieu complet :
Dissoudre le tryptone dans 1,0 L d'eau distillée. Répartir en volumes de 5,0 ml et stériliser à 121oC pendant 15 minutes.
| Tryptone Bile Agar (TBA) [Gélose tryptone et sels biliaires] |
| Milieu de base |
| Tryptone |
20,0 g |
| Sels biliaires no. 3 |
1,5 g |
| Gélose |
15 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| pH to 7,2 ± 0,2 |
|
Milieu complet :
Suspendre les ingrédients du milieu de base dans 1,0 L d'eau distillée. Chauffer jusqu'à ébullition en agitant fréquemment pour dissoudre tous les ingrédients. Stériliser à 121oC pendant 15 minutes. Distribuer 15-20 ml par boîte de Pétri sur une surface plane.
| Tryptone Broth and Tryptone Salt Broths (T1N0, T1N1 T1N3, T1N6, T1N8, T1N10) [Bouillon tryptone et bouillons tryptone et sel (T1N0, T1N1 T1N3, T1N6, T1N8, T1N10)] |
| Milieu de base |
| Tryptone |
10,0 g |
| Chlorure de sodium (NaCl) |
0,0, 10,0, 30,0, 60,0, 80,0 ou 100,0 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| pH 7,2 ± 0,2 |
|
Milieu complet :
Suspendre les ingrédients du milieu de base dans 1,0 L d'eau distillée. Pour T1N0, ne pas ajouter de NaCl; pour T1N1, ajouter 10 g de NaCl (NaCI à 1 % p/v); pour T1N3, ajouter 30 g de NaCl (NaCl à 3 % p/v), etc. Répartir dans des éprouvettes à bouchons qui vissent de 16 X 125 mm. Serrer les éprouvettes pour maintenir la concentration exacte. Stériliser à 121 °C pendant 15 minutes.
| Tryptone Salt (T1N1) Agar (also T1N0, T1N2, T1N3)* [Gélose tryptone et sel (T1N1) (aussi T1N0, T1N2, T1N3)*] |
| Milieu de base |
| Tryptone |
10,0 g |
| Chlorure de sodium (NaCl) |
10,0 g |
| Gélose |
20,0 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| pH 7,1 ± 0,2 |
|
Milieu complet :
Suspendre les ingrédients du milieu de base dans 1,0 L d'eau distillée. Chauffer jusqu'à ébullition en agitant fréquemment pour dissoudre tous les ingrédients. Stériliser à 121 °C pendant 15 minutes, laisser refroidir et répartir.
| Note : * Pour T1N0, T1N2, T1N3, utiliser 10 g de tryptone et 0,0 g, 20,0 g et 30,0 g respectivement de NaCl. |
| Tryptose Broth and Agar for Confirmation Tests and Serology [Bouillon et gélose au tryptose pour tests de confirmation et sérologie] |
| Milieu de base |
| Tryptose |
20,0 g |
| Chlorure de sodium (NaCl) |
5,0 g |
| Dextrose |
1,0 g |
| Gélose (omettre pour la préparation du bouillon) |
15,0 g |
| Eau distillée |
1,0 L |
| pH 7,2 ± 0,2 |
|
Milieu complet :
Suspendre les ingrédients du milieu de base dans 1,0 L d'eau distillée. Chauffer jusqu'à ébullition en agitant fréquemment pour dissoudre tous les ingrédients. Stériliser à 121 °C pendant 15 minutes, laisser refroidir et répartir. Préparer des géloses à pente fortement inclinée.
|
