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Procédure de Laboratoire MFLP-54
avril 1998
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DIRECTION GÉNÉRALE DE LA PROTECTION DE LA SANTÉ
OTTAWA
DÉTECTION DE SALMONELLA SPP. DANS LES PRODUITS ALIMENTAIRES ET AGRICOLES PAR HYBRIDATION DE
L'ADN GENE-TRAK ®
Jean-Yves D'Aoust
Division de la recherche, Bureau de dangers microbiens
Direction des aliments, Santé Canada
Repère postal : 2204A2
Ottawa (Ontario) K1A 0L2
1. APPLICATION
Cette méthode peut servir à la détection qualitative de Salmonella spp. dans des
échantillons alimentaires et environnementaux. Ce test de dépistage convient surtout
lorsque l'on ne prévoit pas de suivi à l'égard du produit. Lorsqu'on
prévoit un suivi lié à la conformité du produit, et lorsque le suivi est
obligatoire, il faut utiliser les méthodes officielles et la méthode de la DGPS.
2. DESCRIPTION
Des études de validation exécutées par le fabricant (10.1-10.3) et une étude de
collaboration entre laboratoires réalisée par l'AOAC (10.4) ont démontré
l'efficacité de la méthode pour détecter la présence de
Salmonella spp dans toutes sortes d'aliments contaminés artificiellement. La méthode
a en outre été validée avec des aliments contaminés naturellement dans le cadre
d'études de comparaison et d'études en collaboration réalisées dans
des laboratoires de la DGPS (10.5-10.6). Il convient de signaler qu'une autre méthode
d'enrichissement différente de celle que recommande le fabricant a fait l'objet
d'essais couronnés de succès dans la cadre d'études réalisées
par la DGPS et figure dans la présente méthode de laboratoire.
3. PRINCIPE
Pour effectuer une analyse par hybridation de l'ADN, on emploie des sondes d'ADN
spécifiques aux
Salmonella et un système de colorimétrie pour détecter la présence de Salmonella
spp. dans des échantillons d'essai à la suite de l'enrichissement du milieu de
culture. Les sondes utilisées dans l'analyse réagissent avec les sérotypes
appartenant à toutes les sous-espèces de Salmonella entérica et avec les
sérotypes appartenant à l'espèce distincte Salmonella bongori. On considère
qu'un échantillon ne réagit pas à la
Salmonella spp. si son absorbance (A450) est inférieure ou égale à la
valeur seuil établie pour l'analyse. On considère qu'un échantillon
indique la présence présumée de Salmonella spp. si la valeur de l'absorbance est
supérieure à la valeur seuil établie pour l'analyse. Il faut confirmer les
réactions positives par des méthodes de culture standard suivies d'une identification
biochimique et sérologique.
4. DÉFINITIONS
Voir l'annexe A du volume 3.
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