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Procédure de laboratoire MFLP-68
avril 1998
(Version PDF)
DIRECTION GÉNÉRALE DE LA PROTECTION DE LA SANTÉ
OTTAWA
DÉTECTION DES ENTÉROTOXINES PRODUITES PAR LE STAPHYLOCOCCUS AUREUS DANS LES ALIMENTS
[MÉTHODE DE DOSAGE IMMUNOENZYMATIQUE (ELISA) AU MOYEN DE LA TROUSSE TECRA]
M. Akhtar
Division de la recherche microbiologique
Bureau des dangers microbiens, Direction des aliments
Repère postal : 2204A2
Ottawa (Ontario) K1A 0L2
1. APPLICATION
La présente méthode est conçue pour la détection directe de n’importe
laquelle des sept entérotoxines staphylococciques dans les aliments et les ingrédients
alimentaires. Sa limite de détection atteint ou dépasse 1 ng/mL. Cette méthode permet
de détecter les entérotoxines A,B,C 1,C 2,C 3,D et E.
Comme la méthode ne permet pas d'identifier le type de toxine, il faut utiliser les
méthodes MFLP-67 ou MFLP-69 pour confirmer les résultats positifs. Cette version
révisée remplace la méthode MFLP-68 datée d’octobre 1993.
2. PRINCIPE
L’immuno-essai visuel constitue un test rapide, sensible et spécifique de détection
des entérotoxines staphylococciques. La méthode employée est celle du titrage avec
immunoadsorbant lié à une enzyme (ELISA) de type sandwich (11.1). Des anticorps de capture
qui ont une grande affinité pour les entérotoxines sont adsorbés à la surface des
puits Removawells MD. Si l’échantillon contient des entérotoxines
staphylococciques, les anticorps adsorbés les captureront. Toutes les autres substances
contenues dans l'échantillon sont éliminées par lavage. On complète le sandwich
en ajoutant des anticorps marqués par une enzyme (conjugué), qui sont spécifiques des
entérotoxines staphylococciques. Le virage au vert du substrat incolore révèle ensuite
la présence de l’enzyme.
3. DÉFINITIONS
Voir l’annexe A du volume 3.
4. PRÉLÈVEMENT DES ÉCHANTILLONS
Voir l’annexe B du volume 30
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