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Méthode de la DGPS MFHPB-29
Janvier 2003
(Version PDF)
DIRECTION GÉNÉRALE DES PRODUITS DE SANTÉ ET DES ALIMENTS
OTTAWA
DÉTECTION DES LISTERIA SPP DANS LES ALIMENTS ET LES ÉCHANTILLONS
ENVIRONNEMENTAUX PAR LA MÉTHODE VIDAS LISTERIATM
Don Warburton, Ann Boville et Anne Sewell
Bureau des dangers microbiens, Direction des Aliments
Repère postal : 2204A1
Santé Canada, Ottawa ON K1A 0L2
Courriel : Don _Warburton @hc-sc.gc.ca
1. APPLICATION
Cette méthode s’applique à la détection des Listeria spp dans les
aliments afin de déterminer s’il y a conformité avec les articles 4 et 7 de la Loi
sur les aliments et drogues.
2. DESCRIPTION
La méthode VIDAS Listeria a été homologuée par l’Association Française
de Normalisation (AFNOR) le 17 juin 1994 en tant que méthode rapide d’analyse pour tous
les produits alimentaires humains. Cette homologation a été obtenue en accord avec la
méthode de référence décrite dans la norme française NF EN ISO 11290-1
(8.2). La méthode a également été homologuée en mai 1999 comme Méthode
Officielle Nº 999.06 par l’Association of Analytical Chemists (AOAC). La méthode a
été modifiée par Warburton et coll.
(8.4) afin de permettre l’utilisation d’un bouillon unique (le bouillon Palcam) comme
milieu de préenrichissement pour tous les échantillons alimentaires et environnementaux.
Par la suite, cette méthode a été évaluée lors d’une étude
comparative impliquant des laboratoires de SC, de l’ACIA et des laboratoires privés
(Warburton et coll., DGPSA, données non publiées).
3. PRINCIPE
L’essai VIDAS LIS est un test d’immuno-analyse enzymatique par fluorescence à
utiliser sur le système VIDAS pour la détection qualitative des Listeria spp. La
surface interne du cône, un dispositif jetable semblable à un embout de pipette, est
recouverte par des anticorps anti-Listeria durant la production. La configuration de l’essai
VIDAS LIS empêche les réactions non-spécifiques avec le cône. Tous les
réactifs nécessaires à un essai sont contenus dans une cartouche scellée à
chambres multiples.
L’appareil VIDAS effectue toutes les étapes de l’analyse de façon
séquentielle et automatique. L’échantillon est inoculé dans la cartouche de
réactifs et subit ensuite un cycle d’aspiration /refoulement d’une durée
déterminée dans le cône. Les antigènes Listeria présents dans
l’échantillon se fixent sur les anticorps monoclonaux anti-Listeria fixés
sur la paroi du cône. La partie non fixée de l’échantillon est
éliminée par lavage. Par la suite, des anticorps conjugués à la phosphatase
alcaline sont aspirés/refoulés dans le cône et réagissent avec les complexes
antigène-anticorps de Listeria déjà fixés sur la paroi du cône. Le
conjugué non fixé est éliminé par lavage.
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