SUPPLÉMENT DE LA MÉTHODE
MFHPB-30
1. APPLICATION
Les renseignements qui suivent visent à compléter la méthode MFHPB-30 datée de janvier 2001 et il faut les utiliser dans ce contexte. Ce supplément vise à fournir d'autres renseignements (comme des fournisseurs, des étapes critiques, des étapes de confirmation ou des conseils utiles, etc.)
5. FOURNITURES ET MATÉRIEL SPÉCIAUX
NOTE : Si l'analyste utilise des variantes des médias dont la liste figure dans la présente méthode (disponibles sur le marché ou fabriqués à partir de zéro), il incombe à l'analyste ou au superviseur du laboratoire d'en assurer l'équivalence.
Bouillons et géloses pour Listeria (milieux de base et suppléments disponibles sur le marché)
7) Milieux chromatogènes (suivre les consignes du fabricant pour les préparer et les utiliser)
Plaques mono Rapid L. (Bio Rad Laboratories)
Plaques Aloa (AES Laboratoire)
6. MARCHE À SUIVRE
6.6 Méthode d'isolement
6.6.5 Gélose chromatogène -- on peut utiliser de nouvelles géloses chromatogènes et d'autres géloses d'isolement, mais de concert avec les milieux ci-dessus. Suivre les consignes du fabricant pour les préparer et les utiliser. Sur les plaques mono Rapid L., L. monocytogenes forme des colonies bleues, tandis que les autres souches de Listeria forment des colonies dont la couleur varie de jaune à blanc. Sur des plaques d'Aloa, les colonies de L. monocytogenes forment une couleur bleu-vert entourée d'un cercle opaque tandis que d'autres souches de Listeria produisent une couleur bleu-vert sans le cercle.
6.7 Méthode d'identification -- Confirmation
6.7.3 Motilité :
Gélose : Ensemencer le milieu d'analyse de la motilité à partir de la gélose sélective TA ou TSA-YE. (Ensemencer la gélose au sang et la gélose aux glucides en même temps (voir 6.7.2).) Incuber pendant 48 h (jusqu'à sept jours) à la température de la pièce. Observer tous les jours. SEULES les cellules de Listeria produisent une croissance typique en forme de parapluie.
et/ou
Montage humide : Suivre la méthode décrite dans MFHPB-30, ou la procédure suivante (tirée de la méthode MFLP-38) :
Prélever au moins une colonie caractéristique sur chacune des géloses sélectives, TA ou TSA-YE, et effectuer un montage humide en utilisant une solution saline à 0,85 % comme milieu de suspension et l'objectif à immersion d'huile d'un microscope à contraste de phase. Listeria spp. a la forme de minces bâtonnets courts qui ont une faible motilité rotative ou basculante. Il faut toujours comparer à une culture de Listeria connue. Les cocci, les gros bâtonnets ou les bâtonnets qui se déplacent rapidement par des mouvements natatoires ne sont pas des Listeria spp.
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