2.2.5 Utiliser des techniques aseptiques pour prélever les unités d'échantillonnage
lorsque le lait en poudre est en vrac. Déposer chacune des unités d'échantillonnage
prélevées dans un contenant stérile distinct.
3. MODE OPÉRATOIRE
Les 20 unités d'échantillonnage doivent être analysées individuellement, à
titre de deux ou, de plus de deux unités composites pour déterminer la présence de
bactéries du genre Salmonella. Il faut effectuer les épreuves conformément aux
instructions suivantes:
3.1 Manipulation des unités d'échantillonnage
3.1.1 Analyser les unités d'échantillonnage aussitôt que possible après leur
arrivée au laboratoire.
3.2 Préparation des milieux
Utiliser les milieux suivants après les avoir préparés et stérilisés selon
les instructions du fabricant:
(1) Bouillon nutritif (NB)
(2) Bouillon de sélénite-cystine (SC)
(3) Bouillon de tétrathionate-vert brillant (TBG)
(4) Gélose au sulfite de bismuth (BS)
(5) Gélose de vert brillant-sulfamide (BGS)
(6) Gélose de MacConkey (MA)
(7) Gélose de tri-glucides-fer (TSI)
(8) Gélose de lysine-fer (LI)
(9) Gélose à l'urée de Christensen (CU)
(10) Gélose nutritive (NA)
3.3 Enrichissement en milieu non sélectif (pré-enrichissement)
3.3.1 Prélever une unité d'analyse de 25 g de chaque unité d'échantillonnage
de 100 g. Lorsqu'une unité d'échantillonnage se compose de plus d'un contenant,
mélanger le contenu de chacun des contenants ensemble, de façon aseptique, avant de
prélever l'unité d'analyse de 25 g.
3.3.2 Resuspendre les unités d'analyse individuelles ou les unités composites dans neuf
fois leur poids d'eau distillée.
3.3.3 Ajouter une solution de vert brillant pour obtenir une concentration finale de l:50 000.
3.3.4 Agiter la suspension pour assurer une distribution uniforme des microorganismes
présents.
3.3.5 Vérifier le pH de chaque unité d'analyse ou de chaque unité composite en
suspension. Si le pH ne se situe pas entre 5,6 et 7,0, ajuster le à 7,0 avec du NaOH ou du
HCl stériles.
3.3.6 Ensemencer un bouillon nutritif avec une culture connue de Salmonella et le transférer
par la suite dans tous les autres milieux utilisés dans l'analyse. Considérer ce dernier
comme le témoin positif. Préparer un témoin négatif en incubant les milieux
non ensemencés au cours de chaque étape de l'analyse.
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